矮小伞枝霉-橙黄色色调标准贮备液【ChP-2015】-微小链霉菌SHMCCD60941
该产品不仅适用于琼脂糖凝胶电泳还可用于非变性丙烯酰胺凝胶电泳,加入PCR产物后不会影响后续的酶切反应
溴化乙锭溶液(EB, 10 mg/ml, RNase free)是一种高度灵敏的荧光染色剂,广泛用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA和RNA分子。它经过RNase-free处理,适用于RNA样本的电泳。产品特性成分:10 mg/ml溴化乙锭和去离子水。保存条件:室温避光保存,有效期为2年。用途:用于核酸电泳前后的染色,以及流式细胞仪的样品染色处理。荧光特性:在302 nm紫外光激发下,放射出橙红色信号。检测灵敏度:可检测到少至10 ng的DNA条带。使用方法电泳前染色(胶染法):将100 ml的琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%-2%)放入微波炉中融化。冷却至60℃左右后加入5-10 µl的溴化乙锭溶液(10 mg/ml),轻轻摇匀后倒胶,避免产生气泡。待胶完全凝固后上样电泳,电泳完毕在紫外灯下观察拍照。电泳后染色(泡染法):琼脂糖凝胶电泳后,将胶浸没在含有EB(0.5 µg/ml)的电泳缓冲液或去离子水中。室温下染色15-45分钟(取决于凝胶厚度)。可选脱色处理:用去离子水或1 mM MgSO4溶液室温浸泡10-30分钟,以降低背景荧光。
其中,750 bp条带的浓度最高,约为20 ng/μL,其余条带浓度约为10 ng/μL。
DNA Marker VII是一种即用型的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它由6条线性双链DNA条带组成,条带大小分别为300 bp、500 bp、1000 bp、1500 bp、2000 bp和2500 bp。其中,1500 bp条带的浓度较高(约100 ng/5 µL),显示为加亮带,便于在电泳后快速定位。产品特性即用型设计:已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,使用方便。清晰的电泳条带:条带大小准确,带型清晰,稳定性好。适用范围:适用于1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶电泳。使用方法上样量:根据加样孔的宽度,取2-5 µL加入琼脂糖凝胶的加样孔中。每1 mm × 1 mm的加样孔上样1 µL;如果加样孔较宽,可适当增加上样量。电泳条件: 凝胶浓度:建议使用1.0%-2.0%的琼脂糖凝胶。电泳电压:4-10 V/cm,电泳时间20-30分钟。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
SYBR Green I是qPCR中常用的荧光染料,能够实时监测DNA扩增过程,广泛用于基因表达分析
λ DNA HindIII + EcoRI是一种常用的DNA分子量标准,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,用于估算DNA片段的大小。它是通过将λ噬菌体DNA用HindIII和EcoRI两种限制性内切酶完全酶切后获得的,具有明确的片段大小分布。产品特性片段组成:λ DNA HindIII + EcoRI Marker由13条双链DNA条带组成,片段大小范围从125 bp到21,226 bp。即用型设计:已预混1×上样缓冲液,可直接用于凝胶电泳。稳定性:室温保存一个月带型无变化,但建议低温保存以防止核酸酶污染。使用方法电泳条件:凝胶浓度:建议使用0.5%-1.0%的琼脂糖凝胶。电泳缓冲液:1×TAE或0.5-1×TBE。电压:6-8 V/cm,电泳时间30-60分钟。热处理:使用前建议在65℃水浴中加热5分钟,然后在冰浴中冷却3分钟,以避免COS位点的片段结合。上样量:根据加样孔宽度,取2-5 µL加入凝胶加样孔中。染色与观察:电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,在紫外灯下观察条带。
dNTP Set Solution广泛应用于多种分子生物学实验,如基因扩增、cDNA合成等
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,SYBR Green染料因其高灵敏度和广泛的适用性而被广泛使用。然而,某些qPCR仪器(如某些型号的ABI仪器)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为这些特定需求而设计的优化试剂,它结合了SYBR Green的高效性和低浓度ROX的校正功能,为精准定量提供了有力支持。 低浓度ROX的必要性 在qPCR实验中,ROX参考染料通常用于校正荧光信号的非特异性变化,尤其是在高通量实验中。然而,并非所有qPCR仪器都需要高浓度的ROX。某些仪器(如ABI 7500、7900等)在低浓度ROX存在时能够更好地校正孔间差异,从而提高定量的准确性和重复性。SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)正是为了满足这些仪器的需求而设计的。 产品特点 优化的反应体系:SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX)含有优化的反应缓冲液、dNTPs、Mg²⁺、热启动Taq DNA聚合酶以及低浓度的ROX参考染料。
如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。
MOPS电泳缓冲粉剂(1×)是一种专为核酸电泳设计的缓冲液,广泛应用于RNA和DNA的琼脂糖凝胶电泳实验中。MOPS(3-吗啉丙磺酸)是一种两性离子缓冲剂,具有良好的缓冲能力和稳定性,特别适用于中性pH条件下的核酸分离。产品特性成分:主要由MOPS、乙酸钠和EDTA组成。缓冲范围:pKa值为7.2,有效缓冲范围为pH 6.5-7.9。稳定性高:室温保存,有效期长达1年。即用型设计:粉剂形式,使用时只需用去离子水或双蒸水溶解。使用方法配制1×工作液:取一包MOPS电泳缓冲粉剂,倒入洁净的烧杯中。加入约800 mL去离子水或双蒸水,搅拌溶解。定容至1000 mL,混匀后即可使用。电泳操作:将配制好的1×MOPS缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温避光保存,未开封的产品有效期为1年。
它还常用于实时定量PCR(qPCR)中,通过检测荧光强度的变化来定量分析DNA或cDNA的扩增。
在分子生物学实验中,核酸电泳是检测核酸片段大小和纯度的关键技术之一。3×甲酰胺凝胶上样缓冲液作为一种高效的辅助试剂,为核酸电泳提供了重要的支持。组成成分3×甲酰胺凝胶上样缓冲液的主要成分包括:甲酰胺(Formamide):高浓度的甲酰胺能够有效变性核酸,使其保持单链状态,避免核酸在电泳过程中形成二级结构,从而实现更准确的分子量测定。二甲苯青(Xylene Cyanol FF) 和 溴酚(Bromophenol Blue):这两种染料作为示踪剂,可帮助观察电泳的进程。二甲苯青迁移速度较慢,适用于较大片段的示踪;溴酚蓝迁移速度较快,适用于较小片段的示踪。EDTA(乙二胺四乙酸):螯合二价金属离子,防止核酸被核酸酶降解,同时维持电泳过程中的缓冲环境。使用方法样品混合:将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液。变性处理:混合后的样品在70℃加热5-10分钟,使核酸充分变性。加热后立即置于冰上冷却,以防止核酸重新折叠。电泳上样:将处理后的样品加入凝胶的加样孔中,进行电泳。
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