卡哈瓦刺盘孢-蛹虫草(北冬虫夏草、北虫草)ACCC50623-阿德利节杆菌SHMCCD50293
将核酸样品与3×甲酰胺凝胶上样缓冲液按体积比2:1混合,例如,5 μL核酸样品加入2.5 μL缓冲液
在分子生物学实验中,DNA凝胶电泳是一种常用的分析技术,用于分离和检测DNA片段。而10×DNA Loading Buffer则是这一实验中不可或缺的重要试剂。它是一种10倍浓缩的上样缓冲液,专门用于DNA凝胶电泳,能够帮助DNA样品顺利沉入凝胶加样孔中,并在电泳过程中提供清晰的指示。 10×DNA Loading Buffer的主要成分包括甘油、溴酚蓝、二甲苯青FF和SDS。甘油的作用是增加样品的密度,确保DNA样品能够沉入凝胶孔中,防止样品漂浮。溴酚蓝和二甲苯青FF作为指示剂,分别指示电泳的进程,帮助实验者判断电泳是否达到最佳分离效果。在1%琼脂糖凝胶中,二甲苯青FF的迁移速率与4000个碱基对的DNA片段大致相同,而溴酚蓝的迁移速率则与约500个碱基对的DNA片段相同。 使用10×DNA Loading Buffer时,通常按照1:9(上样缓冲液:DNA样品)的比例混合。例如,对于9μL的DNA样品,加入1μL的10×DNA Loading Buffer,混匀后即可上样。这种缓冲液适用于多种类型的DNA样品,包括PCR产物、质粒DNA和基因组DNA等。
已预混1×Loading Buffer,可直接取2-5 µL进行电泳,无需额外处理。
在分子生物学和生物化学研究中,DNA的完整性和准确性对于实验的成功至关重要。Uracil-DNA Glycosylase (UDG),特别是来自大肠杆菌(E. coli)的UDG,是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶。UDG (5U/µl)以其高效的修复能力和精准的特异性,成为了许多实验中不可或缺的工具。 UDG的作用机制 UDG是一种DNA修复酶,能够特异性识别DNA中的尿嘧啶(U),并将其从DNA链中移除。这种酶的作用机制基于其对尿嘧啶的高亲和力。在DNA合成过程中,尿嘧啶可能会由于脱氨反应或其他化学修饰而意外掺入DNA链中。UDG通过识别这些尿嘧啶,并将其从DNA链中切除,从而防止错误碱基的积累。这种修复过程是维持DNA完整性和基因组稳定性的重要机制。 UDG在实验中的应用 PCR反应中的防污染:在PCR实验中,UDG常用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在PCR反应前加入UDG,可以将引物中的尿嘧啶降解,从而避免引物在反应前的非特异性结合。这种方法被称为“热启动PCR”,能够显著提高PCR反应的特异性和灵敏度。
Hot-Start Taq DNA Polymerase是一种经过优化的热启动DNA聚合酶
T4 UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的重组酶,属于RecA/Rad51家族的同源体。它在双链DNA断裂的修复和复制叉重新启动的过程中起重要作用。T4 UvsX重组酶能够与单链DNA结合并形成核酸蛋白复合物,该复合物通过寻找与双链DNA的互补区域进行杂交,从而完成链置换反应。功能与特性链置换能力:T4 UvsX重组酶能够与单链DNA结合,形成稳定的核酸蛋白复合物,并在双链DNA中寻找同源序列,完成链置换反应。无核酸酶活性:该酶本身不具有核酸酶活性,不会降解DNA。等温扩增:T4 UvsX重组酶是重组酶聚合酶扩增(RPA)技术的核心酶,能够在37-42℃的等温条件下高效扩增DNA。应用场景等温扩增(RPA):T4 UvsX重组酶是RPA技术的关键组分,能够在等温条件下快速、灵敏地扩增DNA。病原体检测:RPA技术可用于检测多种DNA和RNA病原体,如MERS、HIV-1、埃博拉病毒和COVID-19,检测下限通常低于100个拷贝。即时诊断(POCT):RPA技术因其快速、简便的特点,非常适合现场快速诊断试剂的开发。
SYBR Green I是qPCR中常用的荧光染料,能够实时监测DNA扩增过程,广泛用于基因表达分析
Bst DNA Polymerase, Large Fragment 是一种来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的重组酶,具有5′→3′ DNA聚合酶活性和强大的链置换能力,但缺乏5′→3′核酸外切酶活性。这种酶在等温扩增技术中表现出色,尤其适用于环介导等温扩增(LAMP)和滚环扩增(RCA)等应用。功能与特性链置换活性:Bst DNA Polymerase, Large Fragment 具有强大的链置换能力,能够在等温条件下高效扩增DNA。高耐盐性:该酶在高盐环境中表现出良好的活性,适合处理复杂的生物样本。 高灵敏度:能够在低浓度模板下实现高效的DNA扩增。热稳定性:最佳活性温度为65℃,可在60-70℃的温度范围内稳定工作。应用场景环介导等温扩增(LAMP):用于快速、灵敏的病原体检测和基因分析。滚环扩增(RCA):用于DNA的高效率扩增。高GC含量DNA测序:适用于高GC含量的DNA模板的测序。全基因组扩增(WGA):用于微量DNA模板的快速扩增。
通常将 1 μL 的 6×聚蔗糖凝胶上样缓冲液 III 与 5 μL 的核酸样品混合。
在植物分子生物学和遗传学研究中,快速、高效地从植物组织中提取DNA并进行PCR扩增是实验成功的关键。Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)凭借其独特的配方和高效性能,为植物样本的直接PCR扩增提供了强大的支持。 Plant Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一种专为植物样本设计的预混PCR反应体系。它能够有效去除植物组织中的多糖、多酚和其他抑制物,这些成分通常会干扰PCR反应的进行。通过优化的反应缓冲液和特殊的酶系统,该Master Mix能够直接从植物叶片、茎、根等组织中扩增目标DNA,无需复杂的样本前处理步骤,大大节省了时间和人力成本。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将植物样本、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。实验人员可以根据需要选择是否添加染料,或者直接用于下游应用,如克隆、测序或无染料的凝胶电泳分析。
该产品不仅适用于琼脂糖凝胶电泳还可用于非变性丙烯酰胺凝胶电泳,加入PCR产物后不会影响后续的酶切反应
6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 是一种常用的核酸电泳辅助试剂,广泛应用于琼脂糖凝胶电泳中,能够帮助核酸样品沉入凝胶加样孔,并通过示踪染料观察电泳进程。组成成分 6×甘油凝胶上样缓冲液 I× 的主要成分包括:甘油(Glycerol):含量为60%,用于增加样品密度,使样品能够沉入凝胶加样孔。溴酚蓝(Bromophenol Blue):含量为0.05%,作为示踪染料,用于观察电泳进程。二甲苯青(Xylene Cyanol FF):部分配方中还含有二甲苯青,用于更广泛的示踪。橙黄 G(Orange G):部分配方中添加橙黄 G,进一步扩展示踪范围。Tris-HCl 缓冲液:10 mM,pH 7.6,用于维持电泳过程中的稳定环境。EDTA:60 mM,用于螯合二价金属离子,防止核酸在电泳过程中被降解。应用场景该缓冲液主要用于核酸(DNA 和 RNA)的琼脂糖凝胶电泳,适用于多种核酸样品的分析和检测。它能够帮助科研人员更清晰地观察核酸片段的迁移情况,从而准确判断核酸的大小和完整性。
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